2005年07月19日，公交总公司新辟121路，起讫站为跨世纪物流省农科院。

2006年05月13日，公交总公司121路（跨世纪物流省农科院）线路延伸，为解决公交线路终点站问题，起讫站调整为跨世纪物流五洲家居装饰广场。

2009年11月22日，公交总公司121路（跨世纪物流五洲家居装饰广场）线路延伸，为优化公交线型，方便市民出行，同时发展乡村旅游业，起讫站调整为锁石生态园五洲家居装饰广场。

2013年08月11日，江南公交121路（锁石生态园五洲家居装饰广场）调整走向，因五洲家居装饰广场公交场站无法继续使用，为保证线路基本营运秩序，起讫站调整为锁石生态园银城东苑。

2021年03月01日，因锁石生态园周边已逐步拆迁，为合理利用公交资源，优化公交线网，南京公交121路（锁石生态园银城东苑）缩线行驶，起讫站调整为锁石村银城东苑。

2024年12月14日，为优化公交线网资源配置，方便顾家营周边市民公交出行，同时填补钟秀街、柳营西路公交线网空白，加强与地铁站、综合交通枢纽之间的衔接。结合意见征集期间市民提出的可行性建议，南京公交121路（锁石村银城东苑）调整走向，起讫站调整为锁石村定林总站【上行】/定林总站锁石村总站【下行】；203路（定林总站百水桥地铁站西）调整走向，起讫站调整为银城东苑马群街南。

2025年01月06日，南京公交121路原“锁石村总站”下客站调整至锁石村。