2006年06月01日，为解决部分中巴车退出市场后填补公交线网空白点的填补问题，最大限度地满足市民的乘车需求，贵阳公交新辟57路，起讫站为小河建材市场黔春路；新辟65路，起讫站为水电八局宿舍区火车站，因水电八局区域道路狭窄，且正值进行煤气管道施工期间，65路起点站暂时定为合干校（原贵阳啤酒厂），其实际运行区间为合干校火车站；新辟67路，起讫站为绿苑小区大营坡，由于绿苑小区道路还不具备通行条件，67路公交车的起始站暂为绿苑雅然居；新辟68路，起讫站为嘉润路口省公路职教中心。新辟69路，起讫站为工学院贵工分校。

2006年08月18日，为解决水电八局区域市民的出行问题，贵阳公交在65路新投入8辆车身长7.6米的小型巴士（车型为CDK6760CN）从水电八局始发；65路其余18辆大型巴士仍在合干校始发。65路由此分为合干校火车站与水电八局宿舍区火车站两个运行区间，前者继续沿用65路线路号，后者在不久后即更名为74路。

2015年09月12日，为解决贵阳北站乘客的出行需求，贵阳公交65路（贵阳高新区管委火车站）线路延伸，起讫站调整为贵阳北站火车站。