2005年09月28日，集团姑苏公司花山专线（苏州乐园龙池花山景区）调整走向并更名为333路。

2006年09月28日，原集团姑苏公司所属39路、302路、303路、316路、333路移交集团新区公司运营管理。

2006年09月30日，集团新区公司333路（苏州乐园龙池花山景区）线路延伸，起讫站调整为爱河桥马涧小区，同时新辟区间线路，起讫站为龙池风景区马涧生态园。

2007年08月26日，集团新区公司333路（爱河桥马涧小区）线路延伸，起讫站调整为爱河桥苏州软件学院。

2022年05月16日，集团新区公司333路（东菱科技（软件学院）首末站石路南）调整走向，起讫站调整为龙景花园首末站彩虹新村。

2025年05月31日，集团新区公司333路（龙景花园首末站彩虹新村）由双向发车调整为龙景花园首末站龙景花园首末站单循环运营。